菌落計數的操作流程

　　菌落計數器可減輕實驗人員的勞動強度，提高工效，提高工作質量，廣泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛生用品、飲用水、生活污水、工業廢水、臨床標本中細菌數的檢驗。是各級隆重防疫站、環境監測站、食品衛生監督檢驗所、醫院、生物制品所、藥檢所、商檢局、食品廠、飲料廠、化妝品廠、日化廠及大專院校、科研單位實驗室的儀器。

　　菌落計數的操作流程

　　樣品的稀釋

　　固體和半固體樣品

　　稱取25 g置盛有225 mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質杯內，8000 r/min～10000 r/min均質1min～2 min，或放入盛有225 mL稀釋液的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1min～2 min，制成1:10的樣品勻液。

　　液體樣品

　　以無菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)中，充分混勻，制成1:10的樣品勻液。

　　上步完成后，用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL，沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面)，振搖試管或換用1支無菌吸管反復吹打使其混合均勻，制成1:100的樣品勻液。

　　培養和計數

　　樣品稀釋完成后，就要進行培養和菌落計數了

　　待瓊脂凝固后，將平板翻轉，36℃±1℃培養48h±2h。水產品30℃±1℃培養72h±3h。

　　如果樣品中可能含有在瓊脂培養基表面彌漫生長的菌落時，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養基 (約4mL)，凝固后翻轉平板，按相同條件進行培養。

　　培養完成后，就要進行菌落計數了，計數可用肉眼觀察，必要時用放大鏡或菌落計數器，記錄稀釋倍數和相應的菌落數量。菌落計數以菌落形成單位表示。

　　大片菌落

　　其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2，代表一個平板菌落數。

　　鏈狀生長

　　當平板上出現菌落間無明

　　顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數。